بررسی آلودگی کشت های سلول vero,rk-13و mrc5 به سلول های سرطانی hela با انگشت نگاری dna با استفاده از آنالیز تکراری کوتاه(str)

خلاصه: استفاده از کشتهای سلولی یکی از ابزارهای مهم پژوهشهای زیستی می باشد. آلودگی کشت های سلولی با سلولهای hela به عنوان خطری بالقوه برای تحقیقات سلولی و نتایج حاصل از آن محسوب می شود. در این تحقیق از آنالیز توالی های تکراری کوتاه (str) برای تشخیص آلودگی های سلولی به hela استفاده شده است. مواد و روش ها: برای تشخیص آلودگی سلولهایrk-13 ، vero و mrc-5 به سلول های hela، از تعداد سیزده str؛ مبتنی بر سیستم combined dna index system (codis) همراه با ژن آمیلوژنین (برای تشخیص جنسیت سلول ها) استفاده شد. برای تکثیر strها از pcr استفاده گردید، برای مشاهده اندازه هر کدام از strها الکتروفورز با ژل پلی اکریل آمید (page) بکار گرفته شد. در نهایت با رنگ آمیزی ژل با نیترات نقره و تجزیه و تحلیل باند های بدست آمده، بوسیله نرم افزار labworks، کدهای عددی هر کدام ازstrها با کدهای عددی strهای موجود در دو مرجع (atcc) و (jcrb) (برای تعیین آلل معرف نوع سلول) مقایسه شدند. یافته ها و نتیجه گیری: نتایج بدست آمده نشان داد که سلول های مورد مطالعه، فاقد آلودگی به hela می باشند. آلودگی عمدی سلولها با سلولهای hela به میزان 10% برای mrc-5 و 5% برای vero و 2% برای rk-13 با این روش تشخیص داده شد که می تواند به عنوان معیاری برای حساسیت روش استفاده از آنالیز توالی های تکراری کوتاه (str) بکار رود